多克隆抗體的第一步和單克隆抗體一樣,都是將免疫原注射到宿主體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng),激活了多種B細(xì)胞。不同的是免疫過后,多克隆抗體就直接從免疫宿主的血清中分離出來,或接著進行純化,沒有與骨髓瘤細(xì)胞融合的過程。一旦宿主動物死亡,需要免疫新的動物,這時血清中的抗體就會有所不同。雖然多抗每批次有輕微差別,但是因為它識別的表位多,這個差別影響并不算太大,而單克隆抗體雖然價格偏高,可是特異性更強更穩(wěn)定??梢哉f單抗和多抗是各有各的優(yōu)點。
多克隆抗體更適用于:
1、檢測有高同源性的抗原的已知或未知同種型
2、檢測濃度較低的抗原
3、捕獲盡可能多的抗原 (例如 IP 或 ChiP)
4、檢測變性的蛋白
5、檢測可能發(fā)生了糖基化或形態(tài)變化的目標(biāo)蛋白
6、用多種檢測方法檢測一種原蛋白時
7、檢測 pH 和鹽度不同的溶液中的目標(biāo)蛋白
多克隆抗體不建議用于:
1、量化檢測,比如:流式。由于不同表位的結(jié)合導(dǎo)致信號被放大加強,可能會導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確
2、當(dāng)高同源性蛋白的交叉反應(yīng)會引起問題時