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人elisa試劑盒注意事項與操作步驟
  • 發布日期:2021-04-02      瀏覽次數:2127
    • 人elisa試劑盒注意事項:

      1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

      2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

      3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內,如標本數量多,使用排槍加樣。

      4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值大于標準品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

      5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

      6.底物請避光保存。

      7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

      8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

      人elisa試劑盒操作步驟

      1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

      2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

      3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

      4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

      5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。

      6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。

      7.溫育:操作同 3。

      8.洗滌:操作同 5。

      9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
      15 分鐘.

      10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

      11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。

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